Agen chemiluminescent yang digunakan untuk pendaran sangat berbeda!
October 23 , 2024
Teknologi immunoassay chemiluminescence telah lama terkenal di bidang diagnostik in vitro! Ini termasuk, chemiluminescence langsung, electrochemiluminescence, chemiluminescence enzimatik, chemiluminescence tidak langsung. Begitu banyak jenis pendaran yang menggunakan zat pendar yang juga sangat berbeda! 1. Acridine ester
Kemiluminesensi langsung
Acridine ester (AE) merupakan senyawa organik trisiklik yang rentan terhadap oksidasi. Ketika dioksidasi oleh H2O2 dalam kondisi basa, ia memancarkan cahaya dengan panjang gelombang 470nm dan memiliki efisiensi cahaya yang tinggi. Produk tereksitasinya N-methylacridone adalah luminit dari sistem reaksi pendaran. Ini digunakan untuk pelabelan hapten dan protein atau antibodi poliklonal atau monoklonal.
Ini adalah bahan sintetis, yang tidak ada di alam, sehingga tidak ada gangguan kebisingan latar belakang; Acridine ester relatif tidak sensitif terhadap perubahan pH dan suhu. Pada saat yang sama, berat molekulnya hanya 481, efek hambatan spasialnya kecil, dan reaksi oksidasi tidak memerlukan katalis, asalkan dapat dilakukan dalam lingkungan basa.
Pendaran bereaksi dengan cepat dan memiliki latar belakang yang rendah. Selama reaksi oksidasi, konjugat terurai, sehingga pendaran ester acridine bebas tidak terhambat, dan reagen memiliki stabilitas yang baik. Ini adalah pilihan agen luminescent yang sangat baik di industri.
Terapridine ruthenium [RU(bpy)3]2+ adalah zat elektrokimia yang teroksidasi dengan donor elektron tripropilamin (TPA) pada permukaan anoda. Pelabelan langsung pada antigen atau antibodi.
Pendaran ditandai dengan emisi cahaya yang stabil hanya 0,01 ms, mencapai puncaknya pada 300 ms, dan siklus elektrochemiluminescence ratusan ribu siklus per detik sangat meningkatkan sensitivitas analisis.
Penandaannya stabil dan mudah dikendalikan, tetapi medan listrik memerlukan sel pengukur khusus, dan diperlukan waktu 40-60 detik untuk membersihkan sel pengukur setelah setiap pengukuran untuk mengembalikan elektroda ke keadaan, yang mudah menyebabkan kontaminasi silang, mempengaruhi keakuratan hasil, dan mengurangi kecepatan analisis.
3.Luminol dan turunannya
Kemiluminesensi enzimatik
Luminol (3-aminobenzoylhydrazide), isoluminol (4-aminobenzoylhydrazide) dan turunannya memiliki sifat chemiluminescent.
Dalam larutan netral: biasanya hadir sebagai ion dipol (zwitterion).
Dalam larutan basa: menjadi anion divalen, yang dapat dioksidasi oleh molekul oksigen menjadi zat antara yang dapat menghasilkan fenomena chemiluminescence.
Dalam oksidan: luminol diubah menjadi keadaan tereksitasi, yang meluruh ke keadaan dasar dan berfluoresensi.
4. adamantane AMPPD
Kemiluminesensi enzimatik
Secara umum, struktur adamantane sangat stabil, tetapi ketika alkali fosfatase ditemui, alkali fosfatase akan mengkatalisis adamantane untuk menghilangkan gugus fosfat untuk membentuk zat antara yang tidak stabil, yang secara otomatis akan terurai dan menghasilkan sinyal cahaya 470nm, yang dapat bertahan selama puluhan menit hingga beberapa jam.
5. Chemiluminescence yang diinduksi foto
kekhasan
Waktu reaksi singkat: Pola reaksi homogen.
Sensitivitas tinggi: Proses reaksi diperkuat langkah demi langkah, dan pendaran dengan cepat meningkatkan sensitivitas.
Stabilitas yang baik: Seluruh proses pembangkitan, transfer, dan amplifikasi energi (cahaya) sangat stabil, dan tidak mudah terpengaruh oleh pH, kekuatan ionik, dan suhu.